化學(xué)發(fā)光免疫分析儀結(jié)構(gòu)與工作原理簡介將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記在抗原或抗體上,或使酶作用于發(fā)光底物上,利用發(fā)光信號測量儀器測量出發(fā)光物質(zhì)或酶反應(yīng)底物上光子的數(shù)量,就可以得到免疫反應(yīng)時的被測物質(zhì)的濃度在單光 ... 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀結(jié)構(gòu)與工作原理簡介
將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記在抗原或抗體上,或使酶作用于發(fā)光底物上,利用發(fā)光信號測量儀器測量出發(fā)光物質(zhì)或酶反應(yīng)底物上光子的數(shù)量,就可以得到免疫反應(yīng)時的被測物質(zhì)的濃度
在單光子計數(shù)器問世之前,人們大多采用光度計作為光信號的主要檢測儀器,其原理為通過光電轉(zhuǎn)換器件將光信號轉(zhuǎn)換為電壓或電流信號,再加以放大。其主要特點為:結(jié)構(gòu)簡單、性能穩(wěn)定,但靈敏度低、線性范圍較窄。目前常見的光學(xué)檢測儀器,如:紅外/可見光/紫外分光光度計、熒光分光光度計、酶標(biāo)儀、照度計等均采用類似原理。這類技術(shù)主要采用光敏二極管、光敏電池、光電偶合器(CCD),或者以光電流放大方式工作的常規(guī)光電倍增管作為檢測器件。
當(dāng)發(fā)現(xiàn)失控信號時,首先確保化學(xué)發(fā)光免疫分析儀運行正常,可以考慮采用如下步驟去分析原因并處理:
1.復(fù)查測定同一批質(zhì)控品。化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的質(zhì)控品往往是復(fù)溶后-20℃冰凍保存,復(fù)查時一定要保證質(zhì)控品解凍時間充分并充分混勻。此步主要用以查明人為誤差,還可以查出偶然誤差。重測的結(jié)果應(yīng)在允許范圍內(nèi)。如果重測結(jié)果仍不在允許范圍,則可以進行下一步操作。
2.新溶一瓶質(zhì)控品,復(fù)查失控項目。確認化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標(biāo)曲線在穩(wěn)定期內(nèi)進行該操作。如果新溶的質(zhì)控血清結(jié)果在允許范圍內(nèi),那么考慮原來的質(zhì)控血清可能過期、放置時間過長而變質(zhì)、儲存環(huán)境出現(xiàn)問題或者被污染等。如果結(jié)果仍不在允許范圍,則進行下一步。
3.新開一盒失控項目的試劑,重測質(zhì)控。確認化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標(biāo)曲線在穩(wěn)定期內(nèi)進行該操作。如果結(jié)果在控,說明之前上機的試劑可能有問題,檢查它們的使用有效期和上機有效期,或咨詢廠家該批試劑信息,以查明問題所在。如果結(jié)果仍不在允許范圍,則進行下一步。
4.重新校準(zhǔn)失控項目,重測質(zhì)控。首先化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標(biāo)曲線超出穩(wěn)定期是要重新進行定標(biāo)的,也只有確定定標(biāo)曲線在有效期范圍內(nèi)才能進行2、3步的操作。如果定標(biāo)曲線在穩(wěn)定期內(nèi),不到萬不得已不會用新的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器。如果重新校準(zhǔn)后結(jié)果在控,說明之前的校準(zhǔn)品有問題,檢查之前校準(zhǔn)品的有效期、儲存環(huán)境或詢問廠家該校準(zhǔn)品信息。如果結(jié)果仍不在允許范圍,只有和儀器或試劑廠家請求他們的技術(shù)支援了。