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化學(xué)發(fā)光試劑是某種物質(zhì)分子吸收化學(xué)能而產(chǎn)生的光輻射。任何一個(gè)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)都包括兩個(gè)關(guān)鍵步驟,即化學(xué)激發(fā)和發(fā)光。因此,一個(gè)化學(xué)反應(yīng)要成為發(fā)光反應(yīng),必須滿足兩個(gè)條件:*:反應(yīng)必須提供足夠的能量( 170 ~ 300KJ / mol ) ,第二,這些化學(xué)能必須能被某種物質(zhì)分子吸收而產(chǎn)生電子激發(fā)態(tài),并且有足夠的熒光量子產(chǎn)率。到目前為止,所研究的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)大多為氧化還原反應(yīng),且多為液相化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。
化學(xué)發(fā)光試劑的發(fā)光效率是指發(fā)光劑在反應(yīng)中的發(fā)光分于數(shù)與參加反應(yīng)的分子數(shù)之比。對于一般化學(xué)發(fā)光反應(yīng),值約為 10 - 6 ,較典型的發(fā)光劑,如魯米諾,發(fā)光效率可達(dá) 0 . 01 ,發(fā)光效率大于 0 。 01 的發(fā)光反應(yīng)極少見?,F(xiàn)將幾種發(fā)光效率較高的常用的發(fā)光劑及其發(fā)光機(jī)理歸納如下。魯米諾及其衍生物,魯米諾的衍生物主要有異魯米諾、 4— 氨基已基 —N 一乙基異魯諾及 AHEI 和 ABEI 等。魯米諾在堿性條件下可被一些氧化劑氧化,發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng),輻射出zui大發(fā)射波長為 425nm 的化學(xué)發(fā)光。在通常情況下魯米諾與過氧化氫的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)相當(dāng)緩慢,但當(dāng)有某些催化劑存在時(shí)反應(yīng)非常迅速。zui常用催化劑是金屬離子,在很大濃度范圍內(nèi),金屬離子濃度與發(fā)光強(qiáng)度成正比,從而可進(jìn)行某些金屬離子的化學(xué)發(fā)光分析,利用這一反應(yīng)可以分析那些含有金屬離子的有機(jī)化合物,達(dá)到很高的靈敏度。其次是利用有機(jī)化合物對魯米諾化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的抑制作用,測定對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)具有猝滅作用的有機(jī)化合物。其三是通過偶合反應(yīng)間接測定無機(jī)或有機(jī)化合物。其四是將魯米諾的衍生物如異魯米諾 (ABEI) 標(biāo)記到羧酸和氨類化合物上,經(jīng)過液相色譜 (HPLC) 或液相色譜 (LC) 分離后,再在堿性條件下與過氧化氫-鐵氰化鉀反應(yīng)進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測。也可以采用其它分離方法,如將新合成的化學(xué)發(fā)光試劑異硫氰酸異魯米諾標(biāo)記到酵母 RNA 后,通過離心和透析分離,然后進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測。此外應(yīng)用的還有 N 2(B2 羧基丙?;?) 異魯米諾,并對其性能進(jìn)行了研究。
化學(xué)發(fā)光試劑,光澤精以硝酸鹽的形式存在,在堿性介質(zhì)中,過氧化氫將其氧化成四元環(huán)過氧化物中間體,而后裂解生成激發(fā)態(tài)的吡啶酮而發(fā)光。利用光澤精與還原劑作用,可用于測定臨床醫(yī)學(xué)上一些重要的還原性物質(zhì),如抗壞血酸、肌酸酐、谷胱甘肽、葡萄糖醛酸、乳糖、葡萄糖。洛粉堿,洛粉是文獻(xiàn)上記載zui早的化學(xué)發(fā)光試劑,但卻遲遲未得到應(yīng)用,直到 1979 年 Marino 等人將它應(yīng)用于 Co 的測定后才得到重視。此試劑已被用于多種元素的分析測定。過氧化草酸酯類
草酸鹽類化學(xué)發(fā)光反應(yīng)大都生成過氧草酰 (Peroxalate) 中間體,因此這類反應(yīng)亦稱過氧草酰類化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。過氧草酸鹽類化學(xué)發(fā)光分析應(yīng)用的推廣還有賴于新的熒光衍生試劑的開發(fā)。更多相關(guān)知識(shí),請咨詢本公司.