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巴氏染色液染色步驟
更新時(shí)間：2016-08-18瀏覽：1486次
本文內(nèi)容為您介紹產(chǎn)品的核心知識(shí).巴氏染色液為了防止細(xì)胞污染，凡是使用過的固定液，必須過濾后才能再使用。使用過長的固定液，必須用酒精相對(duì)密度計(jì)測(cè)定，酒精濃度低于90%時(shí)應(yīng)該及時(shí)更換新液。濕固定的重要性：標(biāo)本再新鮮時(shí)及時(shí)固定時(shí)保證染色效果的重要因素。如蘇木素對(duì)細(xì)胞核的染色，巴氏染色中胞漿的特殊著色作用，均可因標(biāo)本干燥后固定而大受影響。制片標(biāo)本的郵寄：標(biāo)本再固定15min后取出，立即加甘油數(shù)滴于制片上，裝入密封的小盒中。實(shí)驗(yàn)室在收到標(biāo)本后，先浸入95%酒精中，使甘油溶去，再進(jìn)行染色。
巴氏染色液染色的zui后一步是透明，使細(xì)胞的色度與細(xì)胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與制片封固之間的一項(xiàng)重要步驟。zui常用的透明溶劑使二甲苯，二甲苯的折射率在1.494，載玻片的折射率在1.515，兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現(xiàn)顏色或變得渾濁，一定要更換新液.巴氏染色操作流程 95%乙醇固定（15min）→清水沖洗多次→蘇木素染液（3-5min）→清水沖洗三次→藍(lán)化→95%乙醇漂洗→橙黃染液（1-10s）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（3-5m）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性樹膠封片。
巴氏染色液對(duì)于不同的標(biāo)本需要不同的固定方法。zui為常用的固定方法是95%酒精作為固定液的濕固定法。酒精作為一種脫水劑能夠防止細(xì)胞內(nèi)的酶捋蛋白質(zhì)分解而自容，并凝固細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、脂肪和糖類等，使其保持與組織生活相仿的成分，從而使細(xì)胞各部分，尤其核染色質(zhì)易于著色。對(duì)于巴氏染色來說，酒精固定zui為重要的。如果酒精濃度不足引起的固定不佳，可造成細(xì)胞的人為變化，并可導(dǎo)致假陽性或假陰性的診斷。更多相關(guān)知識(shí),請(qǐng)咨詢本公司.
